Sam&bam文件格式详解

空扰寡人 提交于 2019-12-13 05:04:44

Sam&bam文件格式详解

在SAM输出的结果中每一行都包括十二项通过Tab分隔(\t),从左到右分别是:

1 QNAME,序列的名字(Read的名字)

2 FLAG, 概括出一个合适的标记,各个数字分别代表

1 序列是一对序列中的一个

2 比对结果是一个pair-end比对的末端

4 没有找到位点

8 这个序列是pair中的一个但是没有找到位点

16 在这个比对上的位点,序列与参考序列反向互补

32 这个序列在pair-end中的的mate序列与参考序列反响互补

64 序列是 mate 1

128 序列是 mate 2

假如说标记为以上列举出的数目,就可以直接推断出匹配的情况。假如说标记不是以上列举出的数字,比如说83=(64+16+2+1),就是这几种情况值和。

3 RNAME,参考序列的名字(染色体)

4 POS,在参考序列上的位置(染色体上的位置)

5 MAPQ, mapping qulity 越高则位点越独特

bowtie2有时并不能完全确定一个短的序列来自参考序列的哪个位置,特别是对那些比较简单的序列。但是bowtie2会给出一个值来显示这个段序列来自某个位点的概率值,这个值就是mapping qulity。Mapping qulity的计算方法是:Q=-10log10p,Q是一个非负值,p是这个序列不来自这个位点的估计值。

假如说一条序列在某个参考序列上找到了两个位点,但是其中一个位点的Q明显大于另一个位点的Q值,这条序列来源于前一个位点的可能性就比较大。Q值的差距越大,这独特性越高。

6 CIGAR,代表比对结果的CIGAR字符串,如37M1D2M1I,这段字符的意思是37个匹配,1个参考序列上的删除,2个匹配,1个参考序列上的插入。M代表的是alignment match(可以是错配)

#standard cigar:
#M match
#I insertion
#D deletion

#extended cigar
#N gap
#S substitution
#H hard clipping
#P padding
#= sequence match
#X sequence mismatch

7 RNEXT, mate 序列所在参考序列的名称; 下一个片段比对上的参考序列的编号,没有另外的片段,这里是’*‘,同一个片段,用’=‘;

8 PNEXT, mate 序列在参考序列上的位置;下一个片段比对上的位置,如果不可用,此处为0;

9 TLEN,估计出的片段的长度,当mate 序列位于本序列上游时该值为负值。Template的长度,最左边得为正,最右边的为负,中间的不用定义正负,不分区段(single-segment)的比对上,或者不可用时,此处为0;

10 SEQ,read的序列;序列片段的序列信息,如果不存储此类信息,此处为’*‘,注意CIGAR中M/I/S/=/X对应数字的和要等于序列长度;

11 QUAL,ASCII码格式的序列质量;序列的质量信息,格式同FASTQ一样。

12 可选的字段(field)

AS:i 匹配的得分

XS:i 第二好的匹配的得分

YS:i mate 序列匹配的得分

XN:i 在参考序列上模糊碱基的个数

XM:i 错配的个数

XO:i gap open的个数

XG:i gap 延伸的个数

NM:i 经过编辑的序列

YF:i 说明为什么这个序列被过滤的字符串

YT:Z

MD:Z 代表序列和参考序列错配的字符串

示例:

HWI-ST170:265:5:44:14178:183344#0 145 1 62421 37 63M1I35M 18 56843949 0 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATAGTTTTG CEE?@F@BE@GGEGFBHHEDEEEDEEBEDHHBGHGGFHHDFHHHGGGGFFFEEEHFHFGFHHHHHFHHHFHHHHGHGHEHHHHHHHHHFHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A52
HWI-ST170:264:5:61:3024:21492#0 113 1 62421 37 63M1I29M = 6885283 6822868 CCTGTATACATAGTAATCAAAGTGTACCACTGGTCGGTGTTTGTGTTCAGGCCCCTGTTGGGTAATGTGCATGTGAAGACCTCAGGTGGTATA @:;9AFGCHFHHHEGGGHDCADA?E@EEDAHFHHFFHHHFFHHHHHHHHHFHFHDHHHHHHHHGHGHHGHFHHHHHHHFHHHHHHHHHHHHHH RG:Z:DU23M01_Duroc XT:A:U NM:i:4 SM:i:37 AM:i:37 X0:i:1 X1:i:0 XM:i:3 XO:i:1 XG:i:1 MD:Z:20T22C1A46

FCC1L2FACXX:3:2106:15923:93264 99 1 1073 0 100M = 1461 488 TGTGAAGGCCCCCTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATGT ___eceeegfggggdgiiifghii[degfhfgfdffhhhfhfghiiighiiH^Vbgfffihhiiiihhddbdgfgccca][^bbbbbccbca[X^Y_b_ MD:Z:98A1 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:98 XS:i:98 FCC1L2FACXX:3:2111:13731:89147 163 1 1073 7 100M = 1438 465 TGTGAAGGCCCCGTGCTCTGACTGTGTTAGTGTCCATTTCTCCTTTTACGGTTGTAGCAGTTGCCTTCTACATTGCGGGGATCCTGTATTGGGTGCATAT bbaeeeeefggggefhiiiihiiicgghhigdehhhiiihiieffhiihihbggdghihfgffhihihfgeed_cecac]accb]_bcccbc^a_bcbb MD:Z:12C87 PG:Z:MarkDuplicatesRG:Z:SRR949625 NM:i:1 AS:i:95 XS:i:95

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