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quanTIseq基于反卷积算法,利用bulk samples的RNA_seq数据,可以对肿瘤样本中不同种类免疫细胞的组成进行预测,支持以下10种类型的免疫细胞
B cells
Classically activated macrophages(M1)
Alternatively activated macrophage(M2)
Monocytes
Neutrophils
Natural Killer(NK) cells
Non-regulatory CD4+ T cells
CD8+ T cells
Regulatory CD4+ T(Treg) cells
Dendritic cells
该软件设计成pipeline的形式,直接输入样本对应的测序原始数据,进行预处理,定量,免疫细胞组分预测,数据分析流程示意如下
分成以下3个模块
预处理,使用Trimmomatic处理原始测序数据,去除adapter和低质量碱基
基因表达定量,使用kallisto软件进行定量,定量的方式为TPM
细胞组分预测,该软件的核心,利用反卷积算法预测样本中不同细胞的比例
该软件的用法非常简便,需要输入一个配置文件,在配置文件中指定了样本对应的序列文件的位置,内容示意如下
\t
分隔的三列文件,第一列为样本名称,第二列和第三列分别对应R1端和R2端的序列文件。配置文件写好之后,直接运行一下代码即可
默认情况下,在输出结果目录会产生以下两个文件
quanTIseq_gene_tpm.txt
quanTIseq_cell_fractions.txt
第一个文件为每个样本中基因的TPM表达量,第二个文件为每个样本中免疫细胞组分的定量结果,内容示意如下
通过该软件可以方便的分析肿瘤样本的免疫细胞浸润情况,进一步结合生存分析可以从肿瘤免疫微环境中筛选相关的biomarker。
·end·
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