上周开题老板没在,昨天科会后专门听了我的开题报告,基本上没有对课题设计给出太多意见和建议,不过还是催促快点发文章。
1. 4*和5*的风险似乎没有太多的结果,总让人觉得悬悬的,师兄也建议放放了,主要是PAGE的结果不确定,PCR的条件似乎也不稳定,测序杂合也不好说。我应该自己抽空再优化一下条件;
2. 现在的全长细胞单克隆是最烦人了,而且始终鉴定不出来,这个最头疼!western 是赶紧得出结果的东西,不然细胞总鉴定不了,这么养着也不是个办法;
3. 和孙立军同时合作的cyclin 家族的RT-PCR希望合作愉快,除了RT-PCR之后也是要做Western的,才能获得指标;
4. 主任指示的将构建的载体做原核表达做单抗的工作,也要尽快完成,原核表达的那一套东西早上刚看过资料,基本上应该跟真核表达差不多吧,不过很久没有做分子克隆的东西了,现在连瓶皿之类都要重新准备,更别说感受态细胞等,不过做起来如果顺利的话也很快;
5. 剩余的缺失突变体应该将5*的一套转染细胞,这样又是一个月的时间,提质粒、筛选,这个主要是在前期组化表达的基础上,加一些指标,跟我的4*、5*全长一起,从比较确定的apoptosis上得到指标,发文章,当然此后的工作会更多。
6. 如此说来,我现在的事情好多哦,分子克隆的、养细胞、转细胞、western、RT-PCR,我应该好好利用与安排好时间,让自己充实起来,充分利用好时间,其他的事情也不用没事找事了。
来源:https://www.cnblogs.com/benben/archive/2004/08/15/33491.html