Mass Spectrometry-Compatible Subcellular Fractionation for Proteomics 质谱兼容的蛋白质组学的亚细胞分离(解读人:王茹凯)
文献名:Mass Spectrometry-Compatible Subcellular Fractionation for Proteomics(质谱兼容的蛋白质组学的亚细胞分离) 期刊名: Jpornal of Proteome research 发表时间: (2020年1月) IF : 4.173 单位: 熊本大学 京都大学 庆应大学 物种: 人的细胞 技术: 磷酸化蛋白质组学和蛋白质组学 一、 概述: (用精炼的语言描述文章的整体思路及结果) 本研究选取细胞进行免疫印迹法和间接免疫荧光法、NanoLC−MS进行磷酸化蛋白质组学和蛋白质组学研究。我们使用含有乙二醇EG和相转移表面活性剂PTS的RIPA缓冲液开发了蛋白质组学的新型亚细胞分离分离方法,我们首次确定了蛋白质亚细胞定位的调控磷酸化位点的候选对象。 二、 研究背景: (简要介绍研究进展动态、研究目的和意义) 真核细胞包含多个细胞器。为了观察其中的蛋白质定位,已使用RIPA缓冲液连续离心或与密度梯度法结合的超速离心进行亚细胞分离分离。这些传统的亚细胞分离方案分离效率高,但回收率低。此外,由于蛋白质含量低,以及与MS不相容的表面活性剂(例如Triton X-100和十二烷基硫酸钠SDS),很难将这些分离的样品直接用于基于液相色谱-质谱的蛋白质组学